Kinijos žemės ūkio universiteto (CAU) molekulinės veisimosi laboratorija pasiekė vaisingų rezultatų, susijusių su ryžių, kviečių ir kitų augalų genetinio pagerėjimo sritimi. Ekstrahuojant nukleorūgštis, kuri yra pagrindinė molekulinio veisimo dalis, tradicinis rankinis veikimas riboja mėginio pralaidumą. Didelis kasdienių pavyzdžių skaičius daro rankinį pipetę ne tik neveiksmingą, bet ir linkę į nuovargį bei eksploatavimo klaidas.
„PRCXI BioworkStation Full Process“ įgalinimas:
Kinijos žemės ūkio universitetas (CAU), norėdamas peržvelgti šias kliūtis ir pagerinti eksperimentų efektyvumą ir stabilumą, po daugelio tyrimų ir palyginimų įsigijo PRCXI SC9000 (Manual) ir SC9200\/SC9300 (visiškai automatines) pipetavimo darbo vietas. Po pirmojo naudojimo ir duomenų patikrinimo laboratorijoje, turint reikšmingų kiekvienos laboratorijos pranašumų, kad būtų galima rekomenduoti vienas kitą, buvo sukauptas beveik 20 PRCXI pipetavimo darbo vietų rinkinių.
Šio tipo eksperimento proceso apžvalga:
)
Įrangos paruošimas:
„PRCXI“ pipetės darbo vieta, 96- šulinio plokštelė, patarimai, magnetinis stovas, PGR plokštelės, rezervuarai
Eksperimentinė procedūra:
① Į kiekvieną 96-} šulinio šulinį įpilkite 100 μl mėginio ir 100 μl lizės buferio ir kruopščiai išmaišykite pipetu, 5 kartus, naudodamiesi darbo vieta.
② Prieš naudojimą kruopščiai sūkurys Magnetinės karoliuko pakaba, gerai įpilkite 200 μl prie kiekvienos reakcijos ir sumaišykite pipetę aukštyn ir žemyn 3 kartus, naudodami darbo vietą.
③ Inkubuokite mažiausiai 2 minutes, kad magnetiniai granulės būtų visiškai jungiamos prie nukleorūgščių.
④ Uždėkite 96- šulinio plokštelę ant magnetinio stendo, leiskite atsistoti 1 minutę, tada įkvėpkite ir išmeskite supernatantą ant stendo.
⑤ Nuimkite plokštelę iš magnetinio stovėjimo, įpilkite skalbimo buferio prie kiekvieno šulinio, sumaišykite pipetu aukštyn ir žemyn 5 kartus ir 2 minutes inkubuokite.
⑥ Padėkite plokštelę atgal ant magnetinio stendo, leiskite atsistoti 1 minutę ir išmeskite supernatantą.
⑦ Nuimkite plokštelę iš magnetinio stovėjimo, įpilkite skalbimo buferio prie kiekvieno šulinio ir sumaišykite pipetu aukštyn ir žemyn 5 kartus.
⑧ Padėkite plokštelę ant magnetinio stendo, leiskite atsistoti 1 minutę ir išmeskite supernatantą.
⑨ Į kiekvieną reakciją gerai įpilkite skalbimo buferio, sumaišykite pipetu aukštyn ir žemyn 3 kartus ir inkubuokite 1 minutę.
⑩ Perkelkite plokštę į magnetinį stendą, leiskite jai nusistovėti 1 minutę, tada supernatantą perkelkite į švarią PGR plokštelę (supernatante yra nukleorūgščių).
Šis produktas naudoja šlifavimo homogenizatorių ar ląstelių ardiklį, kad suskaidytų augalinių ląstelių sienas, išlaisvinant nukleorūgštis (DNR arba RNR). Lizės buferio sąlygomis nukleorūgštys specialiai jungiasi prie magnetinių karoliukų paviršiaus. Vėlesni skalbimo žingsniai pašalina priemaišas, tokias kaip baltymai ir polisacharidai. Galiausiai nukleorūgštys išplaunamos iš magnetinių karoliukų, naudojant eliuavimo buferį. Išgrynintos nukleorūgštys gali būti tiesiogiai naudojamos pasroviui pritaikyti, įskaitant PGR aptikimą, genų seką ir dar daugiau.
Klientų atsiliepimai
„PRCXI“ pipetės darbo vieta žymiai pagerino laboratorijos efektyvumą po to, kai ji buvo naudojama. Didelis įrangos tikslumas, nesvarbu, ar tai yra pipetės tūris, ar pipetės aukščio valdymas, veiksmingai išvengė mėginių praradimo ir kryžminio užteršimo bei žymiai pagerino eksperimentinių rezultatų stabilumą ir patikimumą.
Šiais laikais branduolio rūgšties ekstrahavimo darbas laboratorijoje tapo efektyvesnis ir tikslesnis, o tai užtikrina tvirtą palaikymą tolesniam pasėlių genetinio tobulinimo tyrimų tobulinimui.